Title Određivanje lipofilnosti makrocikličkih spojeva tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti Title (english) Lipophilicity determination of macrocyclic compounds by high-performance liquid chromatography Author Petra Mišetić Mentor Vesna Gabelica Marković (mentor)Committee member Nela Malatesti (predsjednik povjerenstva)Committee member Jasminka Giacometti (član povjerenstva)Committee member Karlo Wittine (član povjerenstva)Granter University of Rijeka Defense date and country 2024-09-02, Croatia Scientific / art field, BIOTECHNICAL SCIENCES Universal decimal classificationUDC ) 577 - Biochemistry. Molecular biology. Biophysics Abstract Makrociklički spojevi omogućuju moduliranje kompleksnih farmakoloških meta, pritom
zadržavajući dobra farmakokinetička svojstva. Lipofilnost je jedno od najvažnijih fizikalno
kemijskih svojstava te je izuzetno važno u ranim faza istraživanja imati pouzdanu metodu
za lipofilno profiliranje novih makrocikličkih spojeva. U okviru ove doktorske disertacije
istražena je primjenjivost literaturne CHI metode koja koristi tekućinsku kromatografiju
visoke djelotvornosti za određivanje lipofilnosti makrocikala. Analizirana je početna skupina
makrocikličkih spojeva pri čemu je utvrđeno da je ova metoda manje precizna pri
analizama makrocikala u usporedbi s malim molekulama zbog širenja i asimetričnosti
kromatografskih pikova.
Proučavanjem utjecaja promjena eksperimentalnih kromatografskih uvjeta na vremena
zadržavanja makrocikala utvrđeno je da temperatura kromatografske kolone, brzina
primjerenog gradijentnog programa te protok pokretne faze nemaju značajan utjecaj na
relativne odnose u vremenima zadržavanja makrocikličkih spojeva. Promjena
kromatografske kolone unutar iste USP klasifikacije ne utječe na relativni odnos vremena
zadržavanja istraživanih spojeva, ali poboljšava učinkovitost analiza. Značajan utjecaj na
analize makrocikličkih spojeva primijećen je smanjenjem koncentracije amonijevog acetata
korištenog kao vodeni dio pokretne faze, kao i zamjena amonijevog acetata s amonijevim
hidrogenkarbonatom. Također, upotreba metanola umjesto acetonitrila kao organskog
otapala u pokretnoj fazi značajno mijenja relativni odnos vremena zadržavanja istraživanih
spojeva.
Na temelju slaganja pokazatelja lipofilnosti dobivenih primjenom istraživanih
kromatografskih uvjeta s vrijednostima dobivenim metodom izmućkivanja upotrebom
CAMDIS metode, odabrani su najprikladniji kromatografski uvjeti za lipofilno profiliranje
spojeva iz klase makrocikala. Vrijednosti lipofilnosti dobivene metodom izmućkivanja za
proširenu skupinu makrocikličkih spojeva uspoređene su s onima dobivenima CHI
metodom, optimiziranom metodom i in silico izračunatim vrijednostima. Najbolja korelacija
dobivena je između vrijednosti dobivenih metodom izmućkivanja i metodom za lipofilno
profiliranje makrocikličkih spojeva razvijenom u ovom radu.
Abstract (english) Macrocyclic compounds give an opportunity to modulate difficult targets while maintaining
good pharmacokinetic properties. Lipophilicity is considered to be one of the most
important physio-chemical properties so it is of utmost importance to have a reliable and
precise method for lipophilic profiling of new macrocyclic compounds in the early phases
of drug discovery process. In this dissertation, the applicability of the literature CHI method
that uses high-performance liquid chromatography for lipophilicity determination was
investigated. An initial set of macrocyclic compounds was analyzed and it was discovered
that the method is less precise for lipophilicity determination of macrocycles due to
chromatographic peak broadening and severe tailing.
Investigation of the influence of experimental chromatographic changes showed that the
chromatographic column temperature, gradient speed and mobile phase flow rate do not
influence the relative relationships between retention times of the macrocyclic compounds.
The use of a different chromatographic column in the same USP classification does not
change the relative relationships between the retention times of analytes but results in
enhanced efficiency of analyses. Significant influence on the analyses was observed when
the concentration of ammonium acetate used as the aqueous part of the mobile phase was
decreased, but also when it was replaced with ammonium hydrogencarbonate. Also,
switching from acetonitrile to methanol as the organic part of the mobile phase resulted in
different elution order of macrocyclic compounds.
Based on the correlation of lipophilicity parameters obtained with investigated
chromatographic conditions with the values obtained with the shake-flask method, the
most suitable chromatographic conditions for lipophilic profiling of macrocycles were
selected. The lipophilicity values obtained with the shake-flask method were compared with
the values obtained with the CHI method, the optimized method as well as in silico
calculated lipophilicity. The best correlation was obtained between the shake-flask method
and the chromatographic method developed in this thesis.
Keywords
lipofilnost
makrociklički spojevi
tekućinska kromatografija visoke djelotvornosti
Keywords (english)
lipophilicity
chromatography macrocyclic compounds
high-performance liquid
Language croatian URN:NBN urn:nbn:hr:193:727292 Promotion 2024 Study programme Title: Medicinal chemistry Type of resource Text File origin Born digital Access conditions Open access Terms of use Created on 2024-09-16 11:56:08
