prikaz prve stranice dokumenta Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A
Access restricted to students and staff of home institution
undergraduate thesis
Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A
Rijeka: University of Rijeka, 2017. urn:nbn:hr:193:076512
Mihalić, Andrea
University of Rijeka
Faculty of Biotechnology and Drug Development

Institutional repository: Repository of the University of Rijeka, Faculty of Biotechnology and Drug Development

Cite this document

Mihalić, A. (2017). Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A (Undergraduate thesis). Rijeka: University of Rijeka. Retrieved from https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić, Andrea. "Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A." Undergraduate thesis, University of Rijeka, 2017. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić, Andrea. "Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A." Undergraduate thesis, University of Rijeka, 2017. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić, A. (2017). 'Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A', Undergraduate thesis, University of Rijeka, accessed 28 December 2024, https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Mihalić A. Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A [Undergraduate thesis]. Rijeka: University of Rijeka; 2017 [cited 2024 December 28] Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

A. Mihalić, "Novi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A", Undergraduate thesis, University of Rijeka, Rijeka, 2017. Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:193:076512

Metadata
TitleNovi potencijalni interakcijski partneri:PI3P i protein kinaza A
AuthorAndrea Mihalić
MentorAntonija Jurak Begonja (mentor)
Committee memberIvana Munitić (predsjednik povjerenstva)
Committee memberElitza Petkova Markova - Car (član povjerenstva)
Committee memberAntonija Jurak Begonja (član povjerenstva)
GranterUniversity of Rijeka
(Faculty of Biotechnology and Drug Development)
Rijeka
Defense date and country2017-09-07, Croatia
Scientific / art field,
discipline and subdiscipline		BIOTECHNICAL SCIENCES
Biotechnology
Abstract
Fosfoinozitidi su skupina unutarstaničnih fosfolipida, koji nastaju iz fosfatidilinozitola (PI) djelovanjem brojnih kinaza i fosfataza. Iako su unutar stanice zastupljeni u maloj količini, njihova metabolička aktivnost ukazuje na veliki biološki značaj u regulaciji staničnih procesa i staničnoj signalizaciji. U ovom radu smo pratili fosfoinozitid 3-fosfat (PI3P), te njegov utjecaj na signalni put cAMP/protein kinazu A (PKA) u staničnoj liniji DAMI, stanicama ranog razvojnog stadija megakariocita. Glavni enzim koji producira većinu PI3P u stanicama je Vps34 kinaza (fosfatidil inozitol 3-protein kinaza klase III). PI3P smo u stanicama pratili transficiranjem DAMI stanica sa zelenim fluorescentnim proteinom fuzioniranim na 2xFYVE domenu (GFP2xFYVE) fluorescentnom mikroskopijom. Prisustvo zelenih vezikula odražavalo je lokalizaciju i prisustvo PI3P u DAMI stanicama. Imunofluorescencijom smo u stanicama pratili i lokalizaciju PKA regulatorne I podjedinice (RI), te smo utvrdili djelomičnu kolokalizaciju PI3P i PKA- RI. DAMI stanice koje eksprimiraju GFP-2xFYVE korištene su kao model praćenja inhibicije Vps34 kinaze, te smo ispitali učinak inhibitora ove kinaze (SAR405) na izgled i lokalizaciju zelenih vezikula PI3P u različitim vremenima. U konačnici, ispitali smo učinak inhibicije Vps34 kinaze i nedostatka PI3P na aktivnost PKA prateći raznu fosforilacije VASP na serinu 239 i 157, citoskeletnog supstrata PKA koji odražava njenu aktivnost. Na temelju dobivenih rezultata utvrdili smo kako postoji interakcija signalnog puta PI3P i PKA u megakariocitičnoj staničnoj liniji DAMI, te se otvaraju nova područja istraživanja kako bi se otkrio značaj i važnost ove nove interakcije.
Abstract (english)
Phosphoinositides are a group of intracellular phospholipids, synthesized from phosphatidylinositol (PI) by a number of kinases and phosphatases. Although phosphoinositides are present in small amounts in cells, their high metabolic activity indicates a great biological significance in cellular regulation and signaling. This study focuses on phosphoinositide 3-monophosphate (PI3P), and its role in the cAMP / PKA signaling pathway in the cell line DAMI, that represents early stages of megakaryocyte development. The main enzyme that produces the majority of PI3P in the cells is Vps34 kinase (phosphatidyl inositol 3-protein kinase class III). Here PI3P was monitored by transfecting DAMI cells with green fluorescent protein fused with 2xFYVE domain (GFP2xFYVE) and by fluorescence microscopy. The appearance of green vesicles reflected the localization and presence of PI3P in DAMI cells. The location of PKA regulatory subunit (RI) was determined in cells by immunofluorescence, and it partialy colocalized with PI3P. DAMI cells expressing GFP-2xFYVE were used as a model for monitoring Vps34 kinase inhibition and we tested the effect of Vps34 kinase inhibitor, SAR405 on appearance and localization of vesicles at different times. Finally, we tested the effect of inhibition of Vps34 kinase on PKA activity, monitoring phosphorylation of VASP on serine 239 and 157, the cytoskeletal substrate of PKA that reflects its activity. Based on the results obtained, we determined an interaction of PI3P and PKA signaling pathways in the DAMI cell line. This opens up new area of research to reveal the significance and importance of newly found interaction.
Keywords
Keywords (english)
Languagecroatian
URN:NBNurn:nbn:hr:193:076512
Study programmeTitle: Biotechnology and drug research
Study programme type: university
Study level: undergraduate
Academic / professional title: sveučilišni/a prvostupnik/prvostupnica biotehnologije i istraživanja lijekova (sveučilišni/a prvostupnik/prvostupnica biotehnologije i istraživanja lijekova)
Type of resourceText
File originBorn digital
Access conditionsAccess restricted to students and staff of home institution
Terms of useLicence In copyright icon
Created on2017-11-03 12:01:37