Title NUKLEARNI IZRAŽAJ RECEPTORA EPIDERMALNOG FAKTORA RASTA U SKVAMOZNIM EPITELNIM LEZIJAMA GRKLJANA Title (english) NUCLEAR EXPRESSION OF EPIDERMAL GROWTH FACTOR RECEPTOR IN LARYNGEAL SQUAMOUS EPITHELIAL LESIONS Author Blažen Marijić Mentor Tamara Braut (mentor)Mentor Ita Hadžisejdić (komentor)Committee member Koviljka Matušan-Ilijaš (predsjednik povjerenstva)Committee member Ivica Lukšić (član povjerenstva)Committee member Jelena Tomac (član povjerenstva)Committee member Tamara Braut (član povjerenstva)Committee member Ita Hadžisejdić (član povjerenstva)Granter University of Rijeka Defense date and country 2021-01-22, Croatia Scientific / art field, BIOMEDICINE AND HEALTHCARE Universal decimal classificationUDC ) 616 - Pathology. Clinical medicine Abstract Cilj istraživanja: Smatra se da je prekomjerni izražaj membranskog EGFR-a (mEGFR) u skvamoznim karcinomima (SCC) glave i vrata razlog izraženije aktivnosti EGFR signalnog puta što pridonosi tumorogenezi te terapijskoj rezistenciji. Nakon aktivacije, mEGFR se može translocirati u jezgru (nEGFR) što je povezano s lošijom prognozom i preživljenjem kod mnogih karcinoma. Značaj izražaja ovog receptora u različitim staničnim odjeljcima kod laringealnih lezija nije dovoljno istražen i još uvijek nije jasan. Cilj ove studije je utvrditi izražaj membranskog i nuklearnog EGFR-a kao i status EGFR gena te staničnih proliferatvnih markera kod laringealnih polipa, displazija i skvamoznih karcinoma grljana.
Ispitanici i postupci: U ovome istraživanju imunohistokemijski je analiziran izražaj proteina nEGFR, mEGFR, Ki-67, p53, ciklina D1 i TGF-α te status EGFR gena koristeći fluorescentnu in situ hibridizaciju (FISH) na uzorku od 37 polipa (benignih lezija), 44 displazije i 42 SCC-a grkljana.
Rezultati: U ovoj studiji je dokazana statistički značajna razlika u učestalosti javljanja snažnog izražaja nEGFR-a između ispitivanih skupina od benignih lezija, preko displazija do SCC grkljana (P<0.0001). Također je nađena razlika u učestalosti snažnog izražaja mEGFR između SCC-a grkljana i displazija u odnosu na benigne promjene (P<0.0001). Amplifikacija EGFR gena je dokazana samo u relativno malom broju SCC-a (3/42), no nije je se našlo u ne-neoplastičnim lezijama. Rezultati srednjih vrijednosti izražaja Ki-67 i ciklina D1 značajno su se statistički razlikovali između SCC-a i displazije grkljana, kao i između SCC-a i benignih lezija (P<0.001, odnosno P=0.008), ali nije bilo statistički značajne razlike u srednjem izražaju između displazija i benignih lezija. Također je uočena statistički značajna razlika u srednjem izražaju p53 između SCC-a i benignih lezija (P=0.001), međutim nije nađena statistička razlika kod uspoređivanja izražaja između SCC-a i displazije grkljana. Nije bilo statistički značajne razlike u srednjem izražaju TGF-α između SCC-a, displazije i benignih lezija (P = 0.947). U skupini displazija nađena je statistički značajna pozitivna korelacija između nEGFR i Ki-67 (P=0.029), p53 (P=0.001) i ciklina D1 (P=0.031). No u skupini SCC izražaj nEGFR i mEGFR je pokazao statistički značajnu inverznu korelaciju (P=0.004), a isti je slučaj bio pri analizi korelacije nEGFR i ciklina D1 (P=0.032). Koristeći univariatnu statističku analizu nađena je statistički značajna korelacija između snažnog izražaja nEGFR i lošijeg sveukupnog preživljenja kod bolesnika sa SCC-om grkljana, bilo da je nEGFR analiziran samostalno (P=0.025) ili u kombinaciji s istodobnim snažnim izražajem ciklina D1 (P=0.046) te visokim Ki-67 proliferacijskim indeksom (P=0.043).
Zaključak: Rezultati ove studije ukaziju da bi nuklearna EGFR lokalizacija mogla utjecati na biologiju karcinogeneze grkljana i pokazatelj je lošeg preživljavanja kod pacijenata sa SCC-om grkljana.
Abstract (english) Aim of the study: The membrane EGFR (mEGFR) protein over-expression in the head and neck squamous cell carcinoma (SCC) is considered to cause increased EGFR activity which adds to tumorigenicity and therapy resistance. The mEGFR upon stimulation can translocate to the nucleus (nEGFR) where it has been associated with poor prognosis and worse survival in many cancers. The relevance of differentially located EGFR proteins in laryngeal lesions has not been studied enough and remains unclear. Aim of our study was to examine nuclear and membrane EGFR protein expression as well as EGFR gene status and cell cycle proliferation markers in the laryngeal polyps, dysplasia and SCC using immunohistochemistry and in situ hybridization.
Material and Methods: We examined 37 polyps, 44 dysplasia and 42 squamous cell carcinomas (SCC) for nEGFR, mEGFR, Ki-67, p53, cyclin D1 and TGF-α protein expression using immunohistochemistry and EGFR gene status by FISH.
Results: There was significantly higher frequency of strong nEGFR between SCC, dysplasia and polyps (P<0.0001), and strong mEGFR in the SCC and laryngeal dysplasia comparing to polyps (P<0.0001). Gene amplification was confirmed only in relatively small number of SCC but not in non-neoplastic lesions. The results of the mean values of Ki-67 and cyclin D1 expression differed significantly between SCC and laryngeal dysplasia as well as between SCC and polyps (P<0.001 and P=0.008, respectively), but there was no statistically significant difference in the expression between dysplasia and polyps. There was statistically significant difference in p53 expression between SCC and polyps (P=0.001) however the p53 expression was not statistically different when we compared expression between SCC and laryngeal dysplasia. Also, there was no statistically significant difference of TGF-α expression between SCC, dysplasia and benign lesions (P=0.947). In dysplasia the statistically significant positive correlations between nEGFR, and Ki-67 (P=0.029), p53 (P=0.001), and cyclin D1 (P=0.031) were found. nEGFR and mEGFR expression showed statistically significant inverse correlation in the SCC (P=0.004) as well as nEGFR and cyclin D1 (P=0.032). Univariate statistical analysis showed statistically significant correlation between strong nEGFR protein expression with worse overall survival in laryngeal SCC, alone or in co-expression with strong cyclin D1 and high Ki-67 (P=0.025, P=0.046, P=0.043, respectively).
Conclusion: Our data show that nuclear EGFR cellular localization might influence biology of the laryngeal carcinogenesis and is indicator of poor survival.
Keywords
Imunohistokemija
Receptor epidermalnog faktora rasta
Displazija grkljana
Karcinom grkljana
Karcinogeneza
Keywords (english)
Immunohistochemistry
Epidermal Growth Factor Receptor
Laryngeal Dysplasia
Laryngeal Cancer
Carcinogenesis
Language croatian URN:NBN urn:nbn:hr:184:954627 Promotion 2021 Study programme Title: Biomedicine Postgraduate (doctoral) study programme Type of resource Text File origin Born digital Access conditions Access restricted to students and staff of home institution Terms of use Created on 2021-01-29 18:35:35
