Abstract | Carstvo gljiva velika je i raznolika skupina organizama, od kojih su određene vrste sposobne
izazvati bolesti u ljudi. Hrvatska je turistička zemlja, u kojoj korištenje plaža predstavlja
jednu od glavnih ljetnih aktivnosti. Za razliku od bakteriološke analize mora za kupanje,
koje se već desetljećima provodi, istraživanje gljiva tek je u povojima. Cilj ovoga rada bio je
istražiti bakteriološko opterećenje te brojnost i vrste kvasaca i plijesni, u različitim okolišnim
uvjetima na urbanoj pješčanoj plaži (Crikvenica, Primorsko-goranska županija).
Uzorkovanje pijeska i morske vode provedeno je pet puta u zimskom razdoblju, (svakih 14
dana). Za određivanje mikrobioloških pokazatelja primijenjene su standardne metode, a za
kultivaciju gljiva dva hranjiva medija i različiti uvjeti inkubacije: SDA agar (40°C/3 dana i
37°C/10 dana) i Fungisel agar (30°C/20 dana). Za identifikaciju vrsta poraslih gljiva
korišten je instrument MALDI-TOF MS. U uzorcima pijeska pronađeno je sedam vrsta:
Aspergillus nidulans, A. calidoustus, A. niger, A. flavus oryzae group, Schizophyllum
commune, Trichoderma reesei, Beauveria bassiana, a u uzorcima morske vode tri vrste: A.
niger, A. terreus i Mucor circinelloides., od kojih se niti jedna ne ubraja u WHO-definirane
prioritetne skupine gljivičnih patogena (kritična, visoka ili srednju). Najveći broj vrsta, ali s
najmanjim brojem kolonija, porastao je na SDA agaru 37°C/10 dana. A. niger je jedina vrsta
koja je dokazana i u pijesku i u morskoj vodi. U pijesku su gljive dokazane u svih pet
uzorkovanja, u vrijednostima od 1,7 – 13,4 CFU/g, a u uzorcima morske vode samo u
četvrtom i petom uzorkovanju, u nižim koncentracijama (1,7 – 2,6 CFU/mL). To ukazuje na
znatno veće opterećenje gljivama u pijesku, u usporedbi s morskom vodom, što se odnosi i
na bakteriološko opterećenje. Porast gljiva iz uzoraka mora dobiven je jedino na podlozi
Fungisel agar (30°C/20 dana). Prema kriterijima Uredbe (NN 73/2008) za E. coli i
enterokoke, more je u svim ispitivanjima ocjenjeno kao izvrsno, izuzev u trećem, kada je
ocjenjeno kao dobro, s istovremeno najvišom utvrđenom koncentracijom gljiva u pijesku,
pri temperaturi mora od 8°C i zraka od 11°C. Prema trenutno važećim kriterijima za
kvalitetu pijeska (portugalski i Svjetske zdravstvene organizacije), vrijednosti za enterokoke
bile su iznad portugalskih graničnih vrijednosti samo u jednom uzorku, tijekom drugog
ispitivanja, a vrijednosti za gljive ispod Mycosand kriterija (ukupan broj gljiva od 89
CFU/g), što ukazuje na dobro stanje pijeska ispitane plaže. U cilju smanjenja rizika za
ljudsko zdravlje, potrebno je provoditi dugoročna istraživanje gljiva, u različitim okolišnim
uvjetima. |
Abstract (english) | The kingdom of fungi is a large and diverse group of organisms , of which certain species
are capable of causing diseases in humans. Croatia is tourist country, where the use of
beaches is one of the main summer activities. Unlike the bacteriological analysis of bathing
seas, which has been carried out for decades, research on fungi is still in its infancy. The aim
of this work was to investigate the bacteriological load and the abundance and species of
yeasts and molds in different environmental conditions on an urban sandy beach (Crikvenica,
Primorsko-goranska County). Sampling of sand and sea water was carried out five times in
the winter period (every 14 days). Standard methods were used to determine microbiological
indicators, and two nutrient media and different incubation conditions were used for
mushroom cultivation: SDA agar (40°C/3 days and 37°C/10 days) and Fungisel agar
(30°C/20 days). MALDI-TOF MS instrument was used to identify the types of fungi grown.
Seven species were found in the sand samples: Aspergillus nidulans, A. calidoustus, A.
niger, A. flavus oryzae group, Schizophyllum commune, Trichoderma reesei, Beauveria
bassiana, and in seawater samples three types: A. niger, A. terreus i Mucor circinelloides,
none of which are included in the WHO-defined priority groups of fungal pathogens (critical,
high or medium). The largest number of species, but with the smallest number of colonies,
grew on SDA agar 37°C/10 days. A. niger is the only species that has been proven in both
sand and seawater. In the sand, fungi were detected in all five samplings, in values of 1.7 -
13.4 CFU/g, and in seawater samples only in the fourth and fifth sampling, in lower
concentrations (1.7 – 2.6 CFU/mL). This indicates a significantly higher load of fungi in the
sand, compared to seawater, which also applies to the bacteriological load. The growth of
fungi from sea samples was obtained only on Fungisel agar (30°C/20 days). According to
the criteria of the Regulation (Official Gazette 73/2008) for E. coli and enterococci, the sea
was evaluated as excellent in all tests, except for the third, when it was evaluated as good,
with at the same time the highest determined concentration of fungi in the sand, at a sea
temperature of 8°C and air of 11°C. According to the currently valid sand quality criteria
(Portuguese and World Health Organization), values for enterococci were above the
Portuguese limit values in only one sample, during the second test, and values for fungi were
below the Mycosand criteria (total fungal count of 89 CFU/g), which indicates the good
condition of the sand of the examined beach. In order to reduce the risk to human health, it
is necessary to conduct long-term research on fungi, in different environmental conditions. |