prikaz prve stranice dokumenta Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa
Embargo period 2025-07-25
master's thesis
Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa
Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Pharmacy and Biochemistry, 2024. urn:nbn:hr:163:514737
Papić, Martina
University of Zagreb
Faculty of Pharmacy and Biochemistry
Department of pharmaceutical analysis

Institutional repository: Repository of Faculty of Pharmacy and Biochemistry University of Zagreb

Cite this document

Papić, M. (2024). Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa (Master's thesis). Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Pharmacy and Biochemistry. Retrieved from https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:514737

Papić, Martina. "Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Pharmacy and Biochemistry, 2024. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:514737

Papić, Martina. "Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Pharmacy and Biochemistry, 2024. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:514737

Papić, M. (2024). 'Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa', Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Pharmacy and Biochemistry, accessed 05 January 2025, https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:514737

Papić M. Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa [Master's thesis]. Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Pharmacy and Biochemistry; 2024 [cited 2025 January 05] Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:514737

M. Papić, "Optimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa", Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Pharmacy and Biochemistry, Zagreb, 2024. Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:514737

Metadata
TitleOptimizacija predanalitičke obrade biološkog uzorka za određivanje anastrozola i palbocikliba tekućinskom kromatografijom spregnutom sa spektrometrijom masa
Title (english)Optimization of pre-analytical processing of a biological sample for the determination of anastrozole and palbociclib by liquid chromatography coupled to mass spectrometry
AuthorMartina Papić
MentorMiranda Sertić (mentor)
Committee memberMiranda Sertić (predsjednik povjerenstva)
Committee memberAnita Somborac Bačura (član povjerenstva)
Committee memberAnita Hafner (član povjerenstva)
GranterUniversity of Zagreb
Faculty of Pharmacy and Biochemistry
(Department of pharmaceutical analysis)
Zagreb
Defense date and country2024-07-25, Croatia
Scientific / art field,
discipline and subdiscipline		BIOMEDICINE AND HEALTHCARE
Pharmacy
Medical Biochemistry
Abstract
Cilj ovog rada je odabir optimalne predanalitičke obrade uzorka plazme te razvoj nove metode za istovremenu kvantifikaciju anastrozola (ANA) i palbocikliba (PAL) tekućinskom kromatografijom visoke djelotvornosti spregnute sa spektrometrom masa (LC-MS). Uspoređene su metode taloženja proteina, ekstrakcije čvrstom fazom (SPE), uklanjanja fosfolipida i disperzivne mikroekstrakcije tekuće-tekuće (DLLME). Kako bi se odredili optimalni uvjeti ekstrakcije čvrstom fazom uspoređene su vrijednosti ekstrakcijskih učinkovitosti i utjecaja matrice šest različitih sorbensa u kombinaciji s različitim eluensima. Najbolji rezultati su primjećeni kod ekstrakcije na kolonici sa C18 sorbensom, a eluens je acetonitril (ACN) potom 5 %-tni (v/v) amonijak u MeOH. Kako bi se odredili optimalni uvjeti disperzivne mikroekstrakcije uspoređene su vrijednosti ekstrakcijskih učinkovitosti i utjecaja matrice pet DLLME varijanti. Najbolji rezultati su primjećeni kod DLLME vodenog uzorka gdje je ekstrakcijsko sredstvo kloroform, disperzijsko sredstvo izopropanol, a ionska jakost otapala je povećana dodatkom citratne soli. Uzorci su analizirani i kvantificirani novom LC-MS metodom. Provedena je reverzno fazna kromatografija na bifenilnoj kromatografskoj koloni uz binarnu gradijentnu eluciju. Mobilna faza sastoji se od 0,1 % mravlje kiseline u vodi i 0,1 % mravlje kiseline u ACN. MS analiza provedena je uz elektrosprej ionizaciju u pozitivnom načinu snimanja uz praćenje ionskih tranzicija m/z 448,2→380,0 i m/z 448,2→319,5 za PAL, te m/z 294,1→225,1 i m/z 294,1→210,0 za ANA. Analiti su identificirani na temelju spektara masa i vremena zadržavanja. Kvantitativna analiza provodila se integriranjem kromatografskih pikova.
Abstract (english)
The aim of this work is to select the optimal pre-analytical processing of the plasma samples and the development of a novel method for the simultaneous quantification of anastrozole (ANA) and palbociclib (PAL) by high performance liquid chromatography coupled to a mass spectrometer (LC-MS). The methods of protein precipitation, solid phase extraction (SPE), phospholipid removal and liquid-liquid dispersive microextraction (DLLME) were compared. In order to determine the optimal conditions for solid phase extraction, the values of extraction efficiency and matrix influence of six different sorbents in combination with different eluents were compared. The best results were observed during extraction on a column with C18 sorbent, the eluent in the extraction was acetonitril (ACN), then 5% (v/v) ammonia in methanol. In order to determine the optimal conditions of DLLME, the values of extraction efficiency and matrix influence of five DLLME variants were compared. The best results were observed with the DLLME of the water sample, where the extraction agent is clorophorm, the dispersion agent is isopropanol, and the ionic strength of the solvent is increased by the addition of citrate salt. The samples have been analyzed and quantified by a novel LC-MS method. Reverse phase chromatography was performed on a biphenyl column with binary gradient elution in which the mobile phase consists of 0.1% formic acid disolved in water and 0.1% formic acid disolved in ACN. MS analysis was performed with electrospray ionization in positive imaging mode by monitoring of ion transitions m/z 448,2→380,0 and m/z 448,2→319,5 for PAL, and m/z 294,1→225,1 and m/z 294,1→210,0 for ANA. Analytes were identified based on their mass spectra and retention times. Quantitative analysis was carried out by integrating the chromatogram spikes.
Keywords
Keywords (english)
Languagecroatian
URN:NBNurn:nbn:hr:163:514737
Study programmeTitle: Medical biochemistry - integrated undergraduate and graduate - university study
Study programme type: university
Study level: integrated undergraduate and graduate
Academic / professional title: sveučilišni magistar medicinske biokemije i laboratorijske medicine (sveučilišni magistar medicinske biokemije i laboratorijske medicine)
Type of resourceText
File originBorn digital
Access conditionsEmbargoed access
Embargo expiration date: 2025-07-25
Terms of useLicence In copyright icon
Created on2024-10-09 13:32:27