prikaz prve stranice dokumenta Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio)
  Download
PDF 1.94 MB
master's thesis
Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio)
Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science, 2022. urn:nbn:hr:217:238750
Bošnjak, Arvena
University of Zagreb
Faculty of Science
Department of Biology

Institutional repository: Repository of the Faculty of Science

Cite this document

Bošnjak, A. (2022). Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio) (Master's thesis). Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science. Retrieved from https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:238750

Bošnjak, Arvena. "Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio)." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, 2022. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:238750

Bošnjak, Arvena. "Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio)." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, 2022. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:238750

Bošnjak, A. (2022). 'Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio)', Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, accessed 04 November 2024, https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:238750

Bošnjak A. Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio) [Master's thesis]. Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science; 2022 [cited 2024 November 04] Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:238750

A. Bošnjak, "Imunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio)", Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, Zagreb, 2022. Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:238750

Metadata
TitleImunokemijska karakterizacija protutijela za membranski protein Na+/K+-ATPazu u tkivima ribe zebrice (Danio rerio)
Title (english)Immunochemical characterization of the antibody for membrane protein Na+/K+-ATPase in Zebrafish (Danio rerio) tissues
AuthorArvena Bošnjak
MentorDean Karaica (mentor)
MentorDuje Lisičić (komentor)
Committee memberDuje Lisičić (predsjednik povjerenstva)
Committee memberSandra Hudina (član povjerenstva)
Committee memberBlanka Cvetko Tešović (član povjerenstva)
Committee memberIvan Čanjevac (član povjerenstva)
Committee memberLuka Valožić (član povjerenstva)
GranterUniversity of Zagreb
Faculty of Science
(Department of Biology)
Zagreb
Defense date and country2022-07-06, Croatia
Scientific / art field,
discipline and subdiscipline		NATURAL SCIENCES
Biology
Abstract
Riba zebrica, Danio rerio (Hamilton, 1822), modelni je organizam koji se danas sve više koristi u ekotoksikološkim i biomedicinskim istraživanjima. Kao i drugi kralježnjaci, ribe svoju osmotsku homeostazu organizma održavaju radi normalnog funkcioniranja fizioloških procesa. Natrij-kalij ATP-aza fiziološki je važan integralni membranski protein čija lokalizacija i razvojno-uvjetovana ekspresija u tkivima zebrice još uvijek nije u potpunosti istražena. Imunohistokemija je česta metoda istraživanja lokalizacije proteina u tkivima/stanicama sisavaca, kod koje postupak/odabir fiksacije može doprinijeti maskiranju epitopa te onemogućiti protutijelima uspješno vezanje za svoje specifično mjesto. No, korištenje optimalnih metoda otkrivanja epitopa može značajno poboljšati vezanje korištenog protutijela. Stoga je cilj ovog istraživanja bio utvrditi optimalne uvjete za korištenje protutijela a6F upotrebom različitih metoda otkrivanja epitopa u imunofluorescencijskoj analizi kriopreparata ribe zebrice. Koristeći utvrđene optimalne uvjete cilj je bio istražiti postojanje novih lokalizacija i postojanje razvojno-uvjetovane ekspresije proteina Na+/K+-ATP-aze tijekom prvih 120 h embrionalnog razvoja ribe zebrice. Istraživanje je pokazalo da je obrada kriopreparata deterdžentom SDS (engl. sodium dodecyl sulphate) uz razrjeđenje 1:400 protutijela a6F optimalan uvjet za određivanje lokalizacije proteina Na+/K+-ATP-aze u ribi zebrici. Konačno, otkriveno je da je lokalizacija α1 podjedinice natrij-kalij ATP-aze tkivno specifična te je da je njezina ekspresija razvojno- i zonski-uvjetovana.
Abstract (english)
Zebrafish, Danio rerio (Hamilton, 1822) is a model organism that is increasingly being used today in ecotoxicology and biomedical studies. Fish, like other vertebrates, maintain their osmotic homeostasis to keep processes in their organism in the physiological range. Currently, localization and stage-dependent expression of Na+/K+-ATPase, an important membrane protein, in zebrafish tissue is not fully investigated. Immunohistochemistry is a method which is commonly used for investigating protein localization in mammalian tissues/cells. Choosing the right fixative/fixation procedure is an important step in this method because it can lead to epitope masking that prevents antibodies from successful binding. The usage of optimal antigen retrieval method can significantly improve antibody binding. Thus, the aim of this study was to find optimal antigen retrieval method for determining the localization of Na+/K+-ATPase in zebrafish cryosections. Furthermore, using these optimal conditions the study aimed to investigate the existence of new localization sites and stage-related expression of Na+/K+-ATPase in zebrafish embryos. The study showed that the optimal antigen retrieval method is treatment of cryosections with sodium dodecyl sulfate (SDS) using 1:400 a6F antibody dilution. Finally, it showed that the localization of the Na+/K+-ATPase α1 subunit is tissue specific with stage- and zone-dependent expression.
Keywords
Keywords (english)
Languagecroatian
URN:NBNurn:nbn:hr:217:238750
Study programmeTitle: Enviromental Sciences
Study programme type: university
Study level: graduate
Academic / professional title: magistar/magistra struke znanosti o okolišu (magistar/magistra struke znanosti o okolišu)
Type of resourceText
File originBorn digital
Access conditionsOpen access
Embargo expiration date: 2023-07-06
Terms of useLicence In copyright icon
Created on2022-07-22 10:42:29