prikaz prve stranice dokumenta Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli
  Download
PDF 720.94 KB
master's thesis
Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli
Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science, 2010. urn:nbn:hr:217:382704
Cvetešić, Nevena
University of Zagreb
Faculty of Science
Department of Biology

Institutional repository: Repository of the Faculty of Science

Cite this document

Cvetešić, N. (2010). Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli (Master's thesis). Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science. Retrieved from https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:382704

Cvetešić, Nevena. "Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, 2010. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:382704

Cvetešić, Nevena. "Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, 2010. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:382704

Cvetešić, N. (2010). 'Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli', Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, accessed 03 January 2025, https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:382704

Cvetešić N. Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli [Master's thesis]. Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science; 2010 [cited 2025 January 03] Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:382704

N. Cvetešić, "Kloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli", Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, Zagreb, 2010. Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:382704

Metadata
TitleKloniranje, prekomjerna ekspresija te pročišćavanje molekula tRNAlle i tRNAVal iz bakterije Escherichia coli
Title (english)Cloning, overexpression and purification of Escherichia coli tRNAIle and tRNAVal
AuthorNevena Cvetešić
MentorIta Gruić Sovulj (mentor)
Committee memberIta Gruić Sovulj (predsjednik povjerenstva)
Committee memberKristian Vlahoviček (član povjerenstva)
Committee memberŽeljka Vidaković-Cifrek (član povjerenstva)
GranterUniversity of Zagreb
Faculty of Science
(Department of Biology)
Zagreb
Defense date and country2010-10-15, Croatia
Scientific / art field,
discipline and subdiscipline		NATURAL SCIENCES
Biology
Abstract
Aminoacil-tRNA-sintetaze su enzimi koji kataliziraju nastajanje kovalentne veze između pripadnog para aminokiseline i molekule transfer tRNA (tRNA). Budući da je točnost aminoaciliranja temeljni preduvjet za vjeran prijenos genetičke informacije, ti enzimi su razvili mehanizme popravka kako bi uklonili pogreške nastale prilikom aktivacije nepripadne aminokiseline (popravak prije prijenosa), odnosno prijenosa pogrešne aminokiseline na tRNA (popravak poslije prijenosa). tRNA vrlo često potiče popravak prije prijenosa aminokiseline ali mehanizam tog procesa još nije poznat. U nekim slučajevima tRNA (npr. tRNAIle) mora sadržavati postranskripcijske modifikacije kako bi mogla poticati reakciju popravka. Velike količine biološki aktivne tRNA potrebne su za istraživanja mehanizma tRNAovisnog popravka izoleucil- i valil-tRNA-sintetaze. Priređeni su rekombinantni plazmidi za prekomjernu ekspresiju tRNAIle i tRNAVal pod kontrolom jakog T7 promotora. Optimiran je sustav za preparativnu proizvodnju molekula tRNA in vivo i razvijena je brza i efikasna metoda pročišćavanja posttranskripcijski modificirane tRNA kromatografijom obrnutih faza. Metodama enzimske kinetike istražena su svojstva pripravljenih tRNA.
Abstract (english)
Aminoacyl-tRNA synthetases (aaRS) are enzymes that covalently join amino acids with their cognate transfer RNAs (tRNAs). As highly accurate aminoacyl-tRNA synthesis is a prerequisite for the precise transmission of genetic information, some aaRSs have developed editing mechanisms to correct initial errors in amino acid activation (pre-transfer) or aminoacyltRNA formation (post-transfer). tRNA often stimulates pre-transfer editing by a yet unknown mechanism. In some cases, tRNA has to be posttranscriptionally modified (tRNAIle for example) in order to stimulate editing. Large amounts of biologically active tRNAs are needed to conduct detailed kinetic studies of tRNA-dependent editing by isoleucyl- and valyl-tRNA synthetases. Recombinant plasmids for in vivo overexpression of tRNAIle and tRNAVal under control of T7 strong promotor have been produced. The overexpression has been optimized for preparative purposes and an efficient purification method by reverse phase chromatography has been developed for purification of posttranscriptionally modified tRNAs. The properties of obtained tRNAs were assesed by enzyme kinetics.
Keywords
Keywords (english)
Languagecroatian
URN:NBNurn:nbn:hr:217:382704
Study programmeTitle: Molecular Biology
Study programme type: university
Study level: graduate
Academic / professional title: magistar/magistra molekularne biologije (magistar/magistra molekularne biologije)
Type of resourceText
File originBorn digital
Access conditionsOpen access
Terms of useLicence In copyright icon
Created on2017-05-03 12:17:33