prikaz prve stranice dokumenta Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka
Embargo period 2025-02-27
master's thesis
Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka
Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science, 2023. urn:nbn:hr:217:672888
Stepić, Doris
University of Zagreb
Faculty of Science
Department of Biology

Institutional repository: Repository of the Faculty of Science

Cite this document

Stepić, D. (2023). Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka (Master's thesis). Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science. Retrieved from https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:672888

Stepić, Doris. "Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, 2023. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:672888

Stepić, Doris. "Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka." Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, 2023. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:672888

Stepić, D. (2023). 'Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka', Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, accessed 23 December 2024, https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:672888

Stepić D. Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka [Master's thesis]. Zagreb: University of Zagreb, Faculty of Science; 2023 [cited 2024 December 23] Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:672888

D. Stepić, "Uloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka", Master's thesis, University of Zagreb, Faculty of Science, Zagreb, 2023. Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:672888

Metadata
TitleUloga proteina ITIH5 u otpornosti na ciljanu terapiju vemurafenibom te proliferaciji i aktivnosti glavnih signalnih puteva staničnih linija melanoma čovjeka
Title (english)The role of protein ITIH5 in resistance to vemurafenib targeted therapy, proliferation and activity of major signaling pathways in human melanoma cell lines
AuthorDoris Stepić
MentorIgnacija Vlašić (mentor)
MentorNada Oršolić (komentor)
Committee memberNada Oršolić (predsjednik povjerenstva)
Committee memberMaja Matulić (član povjerenstva)
Committee memberInga Urlić (član povjerenstva)
Committee memberDuje Lisičić (član povjerenstva)
GranterUniversity of Zagreb
Faculty of Science
(Department of Biology)
Zagreb
Defense date and country2023-02-27, Croatia
Scientific / art field,
discipline and subdiscipline		NATURAL SCIENCES
Biology
Abstract
Vemurafenib je selektivni inhibitor mutiranog proteina BRAF V600E koji se javlja u 60% melanoma. Unatoč početnim obećavajućim rezultatima, ubrzo nakon liječenja vemurafenibom dolazi do pojave stečene otpornosti stanica melanoma na ovaj lijek. Stečena otpornost često je posljedica reaktivacije signalnog puta MAPK (engl. mitogen activated protein kinase) ili aktivacije alternativnog signalnog puta PI3K/AKT (engl. phosphoinositide3-kinase/Akt). U mnogim je tumorima, uključujući melanom, uočena smanjena ekspresija gena ITIH5. Unatoč tome, njegova uloga u stečenoj otpornosti stanica melanoma na vemurafenib još nije istražena. Cilj ovog diplomskog rada bio je istražiti učinak utišavanja ovoga gena na otpornost na vemurafenib, na signalne puteve MAPK i PI3K/AKT te na proliferaciju staničnih linija melanoma čovjeka WM793B i A375M. Utišavanje gena ITIH5 provedeno je prolaznom transfekcijom stanica malim interferirajućim RNA koje ciljaju ITIH5 koristeći kalcijev fosfat. Provjera ekspresije i uspješnosti utišavanja provedena je kvantitativnom polimeraznom lančanom reakcijom (qPCR). Nakon utišavanja ITIH5 provjerena je vijabilnost i proliferacija stanica metodom MTT te razina biljega aktivnosti istraživanih signalnih puteva i proliferacije metodom Western blot. Navedene su analize pokazale da tretman vemurafenibom znatno snižava ekspresiju gena ITIH5 te da snižena ekspresija ITIH5 povećava proliferaciju u navedenim staničnim linijama melanoma čovjeka.
Abstract (english)
Vemurafenib is a selective inhibitor of the mutated protein BRAF V600E, which occurs in 60% of melanomas. Despite initial promising results, shortly after treatment with vemurafenib, acquired resistance of melanoma cells develops. Acquired resistance is often the result of the reactivation of the MAPK (mitogen activated protein kinase) signaling pathway or the activation of the alternative PI3K/AKT (phosphoinositide-3-kinase/Akt) signaling pathway. Decreased expression of the ITIH5 gene has been observed in many tumors, including melanoma. However, its role in the acquired resistance of melanoma cells to vemurafenib has not yet been investigated. The aim of this thesis was to investigate the effect of ITIH5 silencing on the resistance to vemurafenib, on the activity of MAPK and PI3K/AKT signaling pathways, and on the proliferation of human melanoma cell lines WM793B and A375M. ITIH5 silencing was performed by transfecting cells with small interfering RNA targeting ITIH5 using calcium phosphate. Verification of expression and success of silencing was performed by quantitative polymerase chain reaction (qPCR). After the silencing of ITIH5, cell viability and proliferation were checked using the MTT test, while the levels of specific markers that represent the activity of signaling pathways or the proliferation was checked using the Western blot method. The results showed that the reduced expression of the ITIH5 increases the proliferation of the human melanoma cell lines and is a consequence of vemurafenib treatment.
Keywords
Keywords (english)
Languagecroatian
URN:NBNurn:nbn:hr:217:672888
Study programmeTitle: Experimental Biology
Study programme type: university
Study level: graduate
Academic / professional title: magistar/magistra eksperimentalne biologije (magistar/magistra eksperimentalne biologije)
Type of resourceText
File originBorn digital
Access conditionsEmbargoed access
Embargo expiration date: 2025-02-27
Terms of useLicence In copyright icon
Created on2023-03-28 11:04:09