prikaz prve stranice dokumenta Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica
  Download
PDF 1.91 MB
doctoral thesis
Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica
Zagreb: University of Zagreb, School of Medicine, 2022. urn:nbn:hr:105:392291
Tomić, Barbara
University of Zagreb
School of Medicine

Institutional repository: Dr Med - University of Zagreb School of Medicine Digital Repository

Cite this document

Tomić, B. (2022). Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica (Doctoral thesis). Zagreb: University of Zagreb, School of Medicine. Retrieved from https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:105:392291

Tomić, Barbara. "Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica." Doctoral thesis, University of Zagreb, School of Medicine, 2022. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:105:392291

Tomić, Barbara. "Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica." Doctoral thesis, University of Zagreb, School of Medicine, 2022. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:105:392291

Tomić, B. (2022). 'Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica', Doctoral thesis, University of Zagreb, School of Medicine, accessed 04 November 2024, https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:105:392291

Tomić B. Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica [Doctoral thesis]. Zagreb: University of Zagreb, School of Medicine; 2022 [cited 2024 November 04] Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:105:392291

B. Tomić, "Signalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica", Doctoral thesis, University of Zagreb, School of Medicine, Zagreb, 2022. Available at: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:105:392291

Metadata
TitleSignalni mehanizmi i metaboličke promjene tijekom diferencijacije i proliferacije leukemijskih stanica
Title (english)Signaling mechanisms and metabolic changes during differentiation and proliferation of leukemia cells
AuthorBarbara Tomić
MentorDora Višnjić (mentor)
Committee memberDrago Batinić (predsjednik povjerenstva)
Committee memberDanka Grčević (član povjerenstva)
Committee memberSvjetlana Kalanj-Bognar (član povjerenstva)
GranterUniversity of Zagreb
School of Medicine
Zagreb
Defense date and country2022-08-31, Croatia
Scientific / art field,
discipline and subdiscipline		BIOMEDICINE AND HEALTHCARE
Clinical Medical Sciences
Clinical Immunology
Universal decimal classification
(UDC)		616 - Pathology. Clinical medicine
Abstract
5-aminoimidazol-4-karboksamid ribonukleozid (AIKAr) prekursor je u biosintezi purina i poznati aktivator kinaze ovisne o AMP-u (AMPK). Naše je prethodno istraživanje pokazalo da AIKAr koči proliferaciju i potiče diferencijaciju stanica akutne mijeloične leukemije (AML) neovisno o AMPK-u. Cilj ovoga istraživanja bio je odrediti ulogu signalnoga puta ATR/Chk1 (prema engl. ataxia-telangiectasia-mutated-and-Rad3-related/checkpoint kinase 1) u diferencijaciji leukemijskih stanica potaknutoj AIKAr-om, koristeći metaboličke testove, tekućinsku kromatografiju s tandemskom spektrometrijom masa (LC/MS/MS), Western blot, protočnu citometriju, farmakološke inhibitore te RNA-interferenciju. Rezultati pokazuju kako učinci AIKAr-a na staničnu diferencijaciju ne ovise o potrošnji glukoze, već ovise o metabolizmu glutamina i sintezi nukleotida, odnosno aktivaciji kinaze Chk1 posljedično manjku pirimidina. LC/MS/MS analiza otkrila je da AIKAr povećava koncentraciju orotata i smanjuje koncentraciju uridin-monofosfata (UMP), u skladu s inhibicijom sinteze UMP-a u reakciji nakon dihidroorotat-dehidrogenaze (DHODH). AIKAr i inhibitor DHODH-a, brekvinar, povećali su izražaj biljega diferencijacije i zakočili stanice u S-fazi staničnog ciklusa. Inhibicija signalnoga puta Chk1 primjenom farmakoloških inhibitora i RNA-interferencije poništila je oba spomenuta učinka. Naši rezultati otkrivaju da je učinak AIKAr-a na diferencijaciju stanica AML uzrokovan poremećajem biosinteze pirimidina te posredovan aktivacijom signalnog puta u odgovoru na oštećenje DNA.
Abstract (english)
5-aminoimidazole-4-carboxamide ribonucleoside (AICAr) is a precursor in purine biosynthesis and a well-known activator of AMP-dependent kinase (AMPK). Our previous research has shown that AICAr inhibits proliferation and promotes differentiation of acute myeloid leukemia (AML) cells in an AMPK-independent manner. The aim of this study was to determine the role of ataxia telangiectasia and RAD3-related (ATR)/checkpoint kinase 1 (Chk1) in AICAr-mediated differentiation of leukemia cells using metabolic tests, liquid chromatography with tandem mass spectrometry (LC/MS/MS), Western blot, flow cytometry, pharmacological inhibitors and RNA-interference. The results show that AICAr-mediated differentiation is independent of glucose consumption, but instead depends on glutamine metabolism, nucleotide synthesis and activation of Chk1 due to pyrimidine depletion. LC/MS/MS analysis revealed that AICAr increased orotate levels and decreased uridine monophosphate (UMP) levels, consistent with inhibition of UMP synthesis at a step downstream of dihydroorotate dehydrogenase (DHODH). AICAr and DHODH inhibitor, brequinar, increased the expression of differentiation markers and arrested cells in the S-phase of the cell cycle. Pharmacologic and siRNA-mediated inhibition of Chk1 pathway diminished both effects. Our results reveal that the effect of AICAr on AML differentiation is caused by impaired pyrimidine biosynthesis and mediated by the activation of DNA damage response pathway.
Keywords
Keywords (english)
Languagecroatian
URN:NBNurn:nbn:hr:105:392291
Study programmeTitle: Biomedicine and Health Sciences
Study programme type: university
Study level: postgraduate
Academic / professional title: doktor/doktorica znanosti, područje biomedicine i zdravstvo (doktor/doktorica znanosti, područje biomedicine i zdravstvo)
Type of resourceText
Extent82 str.
File originBorn digital
Access conditionsOpen access
Terms of useLicence In copyright icon
Created on2022-10-28 11:39:14