prikaz prve stranice dokumenta Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris
  Preuzmi
PDF 1.37 MB
završni rad
Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2018. urn:nbn:hr:159:999781
Rešetar, Josip
Sveučilište u Zagrebu
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
Zavod za kemiju i biokemiju
Laboratorij za biokemiju

Institucijski repozitorij: Repozitorij Prehrambeno-biotehnološkog fakulteta u Zagrebu

Citirajte ovaj rad

Rešetar, J. (2018). Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris (Završni rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:999781

Rešetar, Josip. "Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris." Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2018. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:999781

Rešetar, Josip. "Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris." Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2018. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:999781

Rešetar, J. (2018). 'Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris', Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, citirano: 22.12.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:999781

Rešetar J. Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris [Završni rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet; 2018 [pristupljeno 22.12.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:999781

J. Rešetar, "Konstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris", Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, Zagreb, 2018. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:999781

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:999781
Podaci o radu
NaslovKonstrukcija plazmidnog vektora za transformaciju kvasca Pichia pastoris
Naslov (engleski)Construction of shuttle vector for the transformation of yeast Pichia pastoris
AutorJosip Rešetar
MentorRenata Teparić (mentor)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
(Zavod za kemiju i biokemiju)
(Laboratorij za biokemiju)
Zagreb
Datum i država obrane2018-07-16, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		BIOTEHNIČKE ZNANOSTI
Biotehnologija
Sažetak
Pichia pastoris često je korišteni mikroorganizam u biotehnološkoj proizvodnji heterolognih proteina. Zbog mogućnosti rasta do visokih staničnih gustoća važna je mogućnost njegove primjene u dobivanju kemikalija na ekološki prihvatljiv i ekonomski isplativ način. U ovom radu konstruiran je plazmidni vektor pogodan za transformaciju kvasca Pichia pastoris koji nosi gen za rekombinantni protein Ccw12XR iz kvasca Saccharomyces cerevisiae. Rekombinantni gen se sastoji od dijela koji kodira za enzim ksiloza reduktazu (XR) i dijela koji kodira za protein Ccw12 stanične stijenke kvasca S. cerevisiae. Rekombinantni gen umnožen je PCR metodom i ugrađen TA ligacijom u plazmidni vektor pGEM®-T Easy. Plazmid je umnožen u kompetentnim stanicama E. coli, nakon čega je iz plazmida izrezan rekombinantni gen CCW12XR korištenjem SapI restrikcijskog enzima. Naposljetku je CCW12XR gen ligiran s lineariziranim plazmidom pBSY3Z. Uspješnost ligacije je, nakon umnažanja plazmidnog vektora u kompetentnim stanicama E. coli, provjerena restrikcijom pomoću odabranih restrikcijskih enzima i elektroforezom na agaroznom gelu.
Sažetak (engleski)
Pichia pastoris is a commonly used host in the biotechnological production of heterologous proteins. Since it can grow to very high cell densities, Pichia pastoris is applicable in the eco-friendly and economical production of chemicals. This thesis describes the construction of the shuttle vector, suitable for transformation of Pichia pastoris carrying the gene for the Ccw12XR recombinant protein from Saccharomyces cerevisiae. The recombinant gene encodes both the xylose reductase (XR) and the Ccw12 cell wall protein of S. cerevisiae. The recombinant gene is amplified using PCR and ligated into pGEM®-T Easy. The plasmid is replicated in competent Escherichia coli cells, following which the recombinant CCW12XR gene is restricted from the constructed plasmid using SapI. The isolated CCW12XR gene is then ligated with the linearized pBSY3Z plasmid. Finally, following the replication of the shuttle vector in component E. coli cells, the ligation efficiency is verified via restriction analysis and DNA electrophoresis.
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:159:999781
Studijski programNaziv: Nutricionizam
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: preddiplomski
Akademski / stručni naziv: sveučilišni/a prvostupnik/prvostupnica (baccalaureus/baccalaurea) nutricionizma (univ. bacc. nutr.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaOtvoreni pristup
Uvjeti korištenjaIkona licence Zaštićeno autorskim pravom.
Datum i vrijeme pohrane2018-07-19 09:20:28