prikaz prve stranice dokumenta Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze
  Preuzmi
PDF 1.99 MB
diplomski rad
Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2022. urn:nbn:hr:159:993605
Lilek, Stela
Sveučilište u Zagrebu
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
Zavod za biokemijsko inženjerstvo
Laboratorij za biokemijsko inženjerstvo, industrijsku mikrobiologiju i tehnologiju piva i slada

Institucijski repozitorij: Repozitorij Prehrambeno-biotehnološkog fakulteta u Zagrebu

Citirajte ovaj rad

Lilek, S. (2022). Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze (Diplomski rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:993605

Lilek, Stela. "Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2022. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:993605

Lilek, Stela. "Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2022. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:993605

Lilek, S. (2022). 'Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze', Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, citirano: 22.11.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:993605

Lilek S. Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze [Diplomski rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet; 2022 [pristupljeno 22.11.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:993605

S. Lilek, "Razvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze", Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, Zagreb, 2022. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:993605

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:993605
Podaci o radu
NaslovRazvoj primjene dviju glikozid hidrolaza - ekspresija saharoza fosforilaze na površini S. cerevisiae i praćenje aktivnosti alfa-amilaze
Naslov (engleski)Development of the application of two glycoside hydrolases - expression of sucrose phosphorylase on S. cerevisiae surface and monitoring of alpha-amylase activity
AutorStela Lilek
MentorAnita Slavica (mentor)
Član povjerenstvaRenata Teparić (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstvaBlaženka Kos (član povjerenstva)
Član povjerenstvaJasna Mrvčić (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
(Zavod za biokemijsko inženjerstvo)
(Laboratorij za biokemijsko inženjerstvo, industrijsku mikrobiologiju i tehnologiju piva i slada)
Zagreb
Datum i država obrane2022-09-30, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		BIOTEHNIČKE ZNANOSTI
Biotehnologija
Sažetak
U ovome radu je istražena mogućnost primjene dviju glikozid hidrolaza - saharoza fosforilaze i -amilaze. Primjenom odabranih metoda molekularne biotehnologije gen iz bakterije Leuconostoc mesenteroides koji kodira za saharoza fosforilazu (LmSPaza), umetnut je u plazmid pRST423_Ccw12_G i načinjen je konstrukt pRS_Ccw12LmSPaza. Ovi postupci su provedeni uz korištenje bakterijskog soja Escherichia coli DH5α, čije su transformirane stanice rezistentne na ampicilin. Gen koji kodira za LmSPazu insertiran je u konstruktu pRS_Ccw12LmSPaza između dva dijela gena ScCCW12, čime je osigurana uspješna ekspresija ovoga proteina na vanjskoj površini stijenke kvasca S. cerevisiae. LiAc metodom uspješno su konstruktom pRS_Ccw12LmSPaza transformirana dva soja kvasca S. cerevisiae - S. cerevisiae BY4741 i S. cerevisiae SEY6210, a ekspresija LmSPaze potvrđena metodama SDS-PAGE i Western blot. Hidroliza škroba α-amilazom uspješno je popraćena skenirajućom elektronskom mikroskopijom i na ovaj način su potvrđeni rezultati prethodnih istraživanja u ovoj grupi.
Sažetak (engleski)
The use of two glycoside hydrolases - sucrose phosphorylase and -amylase was investigated in this thesis. By applying selected methods of molecular biotechnology, the gene from the bacterium Leuconostoc mesenteroides, coding for sucrose phosphorylase (LmSPase) was successfully inserted into plasmid pRST423_Ccw12_G and the pRS_Ccw12LmSpase construct was made. These procedures were carried out using the bacterial strain Escherichia coli DH5α, whose transformed cells are resistant to ampicillin. The gene that codes for LmSPase were inserted into the pRS_Ccw12LmSPase construct between two parts of the ScCCW12 gene, which ensured the successful expression of this protein on the outer surface of the S. cerevisiae yeast wall. Using the LiAc method, two S. cerevisiae strains - S. cerevisiae BY4741 and S. cerevisiae SEY6210 were successfully transformed with the pRS_Ccw12LmSPase and LmSPase expression was confirmed by SDS-PAGE and Western blot. Hydrolysis of starch by α-amylase was successfully monitored by scanning electron microscopy and in this way, the results of previous research in this group were confirmed.
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:159:993605
Studijski programNaziv: Bioprocesno inženjerstvo
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: diplomski
Akademski / stručni naziv: magistar/magistra inženjer/inženjerka bioprocesnog inženjerstva (mag. ing. bioproc.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaOtvoreni pristup
Uvjeti korištenjaIkona licence Imenovanje-Bez prerada 4.0 međunarodna (CC BY-ND 4.0)
Datum i vrijeme pohrane2023-02-27 11:19:11