prikaz prve stranice dokumenta Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta
  Preuzmi
PDF 1.84 MB
završni rad
Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2023. urn:nbn:hr:159:484955
Melvan, Antea
Sveučilište u Zagrebu
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
Zavod za biokemijsko inženjerstvo
Laboratorij za biologiju i genetiku mikroorganizama

Institucijski repozitorij: Repozitorij Prehrambeno-biotehnološkog fakulteta u Zagrebu

Citirajte ovaj rad

Melvan, A. (2023). Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta (Završni rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:484955

Melvan, Antea. "Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta." Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2023. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:484955

Melvan, Antea. "Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta." Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, 2023. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:484955

Melvan, A. (2023). 'Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta', Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, citirano: 04.12.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:484955

Melvan A. Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta [Završni rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet; 2023 [pristupljeno 04.12.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:484955

A. Melvan, "Konstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta", Završni rad, Sveučilište u Zagrebu, Prehrambeno-biotehnološki fakultet, Zagreb, 2023. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:484955

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:159:484955
Podaci o radu
NaslovKonstrukcija i molekularna analiza soja kvasca Saccharomyces cerevisiae FF OPO8 yku70delta
Naslov (engleski)Construction and molecular analysis of yeast Saccharomyces cerevisiae strain FF OPO8 yku70delta
AutorAntea Melvan
MentorMarina Svetec Miklenić (mentor)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Prehrambeno-biotehnološki fakultet
(Zavod za biokemijsko inženjerstvo)
(Laboratorij za biologiju i genetiku mikroorganizama)
Zagreb
Datum i država obrane2023-07-14, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		BIOTEHNIČKE ZNANOSTI
Biotehnologija
Sažetak
Cilj ovog rada bio je delecija gena YKU70 u kvascu Saccharomyces cerevisiae soja FF OPO8. Delecija je postignuta korištenjem delecijske kazete YKU70KanMX4 koja ima krajeve homologne DNA regijama koje se nalaze uzvodno i nizvodno od gena YKU70 u genomu kvasca, što omogućava njenu integraciju u ciljno mjesto putem mehanizma ends-out homologne rekombinacije. Također, delecijska kazeta sadrži i selektivni marker KanMX4 koji je omogućio selekciju transformanata uzgojem na podlozi koja sadrži antibiotik geneticin. DNA je zatim izolirana iz odabranih transformanata, a uspješnost izolacije potvrđena je gel elektroforezom. PCR analiza izolirane DNA provedena je upotrebom KanIN-F i KanIN-R početnica, te YKU70IN-F i YKU70IN-R početnica kako bi se potvrdila integracija delecijske kazete YKU70KanMX4 i delecija gena YKU70. Umnoženi fragmenti dobiveni PCR metodom analizirani su gel elektroforezom, čime je utvrđeno da su tri od četiri odabrana transformanta željenog genotipa.
Sažetak (engleski)
The objective of this work was to delete the YKU70 gene in the yeast Saccharomyces cerevisiae strain FF OPO8. Deletion was achieved using YKU70KanMX4 deletion cassette with ends homologous to the DNA regions flanking the YKU70 gene which enables its integration at the target site through ends-out homologous recombination mechanism. Additionally, the cassette contains the KanMX4 selective marker which enabled the selection of transformants through cultivation on a medium containing the antibiotic geneticin. DNA was then isolated from selected transformants and the success of the isolation was confirmed by gel electrophoresis. PCR analysis of the isolated DNA was performed using KanIN-F and KanIN-R primers or YKU70IN-F and YKU70IN-R primers to verify the integration of the YKU70KanMX4 deletion cassette and the deletion of the YKU70 gene. The amplified fragments obtained from the PCR were analysed by gel electrophoresis, which determined that three out of four selected transformants had the desired genotype.
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:159:484955
Studijski programNaziv: Biotehnologija
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: preddiplomski
Akademski / stručni naziv: sveučilišni/a prvostupnik/prvostupnica (baccalaureus/baccalaurea) inženjer/inženjerka biotehnologije (univ. bacc. ing. biotechn)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaOtvoreni pristup
Uvjeti korištenjaIkona licence Imenovanje-Bez prerada 4.0 međunarodna (CC BY-ND 4.0)
Datum i vrijeme pohrane2024-06-17 12:13:30