| Sažetak | CILJ ISTRAŽIVANJA
Cilj istraživanja je verificirati, odnosno djelomično validirati farmakopejske HPLC metode za
određivanje onečišćenja u lijekovima. Cilj je također ispitati čistoću tvari i farmaceutskog proizvoda kroz
provođenje postupka validacije te dati pregled trenutno važećih smjernica i regulatornih zahtjeva u
određivanju onečišćenja u lijekovima, s naglaskom na HPLC metode.
MATERIJAL/METODE
Istraživanje uključuje pregled dostupne znanstvene literature iz područja analitike i kontrole kvalitete
lijekova. Pregled uključuje: znanstvene radove, Američku (USP) i Europsku farmakopeju (Ph. Eur.),
najnovija izdanja stručnih knjiga, elektroničke izvore te važeće smjernice regulatornih tijela. Pregled
regulatornih smjernica posebno je bio usmjeren na internacionalno harmonizirane smjernice (ICH): Q2
“Validacija analitičkih postupaka: Tekst i metodologija”, Q3A “Onečišćenja u novim ljekovitim tvarima”,
Q3B “Onečišćenja u novim ljekovitim proizvodima”, Q6A “Specifikacije: Postupci ispitivanja i kriteriji
prihvatljivosti za nove ljekovite tvari i nove ljekovite produkte: kemijske tvari”.
U postupcima verifikacija/validacija analitičkih metoda, analitičkim protokolima su propisani validacijski
parametri koji će se ispitati, kao i kriteriji prihvatljivosti koji moraju biti zadovoljeni kako bi postupak
verifikacije/validacije bio uspješno proveden.
Sva ispitivanja su provedena prema važećim regulatornim smjernicama, uključujući ICH smjernice,
farmakopeje (Ph. Eur. i USP), pod GMP uvjetima. Ispitivanja su provedena na prikladnim HPLC
instrumentima te su korištene referentne tvari, kao i reagensi prikladne čistoće, u skladu s farmakopejskim
propisima.
REZULTATI
U eksperimentalnom dijelu rada, u verifikaciji Ph. Eur. metode za određivanje srodnih spojeva u
nikotinamidu ispitani su validacijski parametri: selektivnost, preciznost, limit kvantifikacije, te stabilnost
otopina. Prilikom verifikacije USP metode za određivanja graničnih vrijednosti formaldehida i acetaldehida
u polietilen glikolu 3350 ispitani su parametri: selektivnost, preciznost, limit kvantifikacije te stabilnost
otopina. Tijekom verifikacije Ph. Eur. metoda za određivanje monomera etil akrilata i metakrilne kiseline
u kopolimeru metakrilne kiseline i etil akrilata (1:1) i 30%-tnoj disperziji kopolimera metakrilne kiseline i
etil akrilata (1:1) ispitani su validacijski parametri: selektivnost, limit kvantifikacije, preciznost te stabilnost
otopina. Djelomična validacija analitičke metode za određivanje srodnih spojeva u farmaceutskom
proizvodu koji sadrži djelatnu tvar atenolol uključuje provjeru parametara: selektivnost, linearnost, limit
kvantifikacije, preciznost i točnost. Rezultati svih provedenih ispitivanja su unutar kriterija prihvatljivosti
za navedene validacijske parametre.
ZAKLJUČAK
Uspješno su provedene verifikacije farmakopejskih HPLC metoda za određivanje onečišćenjima u
farmaceutskim tvarima, kao i djelomična validacija HPLC metode za određivanje srodnih spojeva u
farmaceutskom proizvodu. Rezultati provedenih ispitivanja bit će korišteni u farmaceutskoj industriji, a
verificirane/validirane analitičke metode će biti rutinski primjenjivane u analitici ovih proizvoda u
laboratorijima kontrole kvalitete. |
| Sažetak (engleski) | OBJECTIVES
The purpose of this study is to verify/partially validate pharmacopoeial HPLC methods for
determination of impurities in drugs. The objective is to investigate the purity of tested substances and
pharmaceutical product during the validation process and to provide an overview of the current guidelines
and regulatory requirements for determination of impurities in drugs, with emphasis on HPLC methods.
MATHERIAL/METHODS
Research includes a review of available scientific literature in the field of analytics and quality control
of medicines. The review includes scientific papers, the United States Pharmacopoeia (USP) and European
Pharmacopoeia (Ph. Eur.), the latest editions of professional books, electronic sources and valid guidelines
of regulatory bodies. The review of the regulatory guidelines was specifically directed towards ICH
Harmonised Guidelines: (ICH): Q2 "Validation of Analytical Procedures: Text and Methodology", Q3A
"Impurities in New Drug Substances", Q3B "Impurities in New Drug Products", Q6A "Specifications: Test
Procedures and Acceptance Criteria for New Drug Substances and New Drug Products: Chemical
Substances".
Validation parameters which will be examined, as well as acceptance criteria which have to be met in order
to successfully validate methods, are prescribed in method validation/verification protocols.
All tests were conducted according to valid regulatory guidelines, including ICH Guidelines,
Pharmacopoeias (Ph. Eur. and USP), in GMP environment. Tests were performed using appropriate HPLC
instruments. Reference standards, as well as reagents of appropriate purity were used, in accordance with
pharmacopoeias.
RESULTS
In the experimental part, the following validation parameters were tested during the verification of
Ph. Eur. method for determination of related substances in nicotinamide: selectivity, precision, limit of
quantification and stability of solutions. During the verification of USP method for limits of formaldehyde
and acetaldehyde in polyethylene glycol 3350, the following parameters were tested: selectivity, precision,
limit of quantification and stability of solutions. In the verification of Ph. Eur. method for determination of
monomers: ethyl acrylate and methacrylic acid in the methacrylic acid – ethyl acrylate copolymer (1:1) and
methacrylic acid - ethyl acrylate copolymer (1:1) dispersion 30 per cent, the following validation
parameters were examined: selectivity, limit of quantification, precision and stability of solutions. During
the partial validation of the analytical method for determination of related substances in the
pharmaceutical product which contains active substance atenolol, the following parameters were
checked: selectivity, linearity, limit of quantification, precision and accuracy. The results of all performed
tests are within the acceptance criteria which were set for the validation parameters being examined.
CONCLUSION
Verification studies of pharmacopoeial methods for determination of impurities in pharmaceuticals,
as well as a partial validation of HPLC method for determination of impurities in a pharmaceutical product
have been successfully performed. The results of tests carried out will be used in the pharmaceutical
industry and verified/validated analytical methods will be routinely applied in quality control of these
products in quality control laboratories. |
