prikaz prve stranice dokumenta Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom
Pristup korisnicima matične ustanove
diplomski rad
Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Farmaceutsko-biokemijski fakultet, 2016. urn:nbn:hr:163:993535
Radić, Dora
Sveučilište u Zagrebu
Farmaceutsko-biokemijski fakultet
Zavod za medicinsku biokemiju i hematologiju

Institucijski repozitorij: Repozitorij Farmaceutsko-biokemijskog fakulteta Sveučilišta u Zagrebu

Citirajte ovaj rad

Radić, D. (2016). Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom (Diplomski rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Farmaceutsko-biokemijski fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:993535

Radić, Dora. "Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Farmaceutsko-biokemijski fakultet, 2016. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:993535

Radić, Dora. "Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Farmaceutsko-biokemijski fakultet, 2016. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:993535

Radić, D. (2016). 'Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom', Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Farmaceutsko-biokemijski fakultet, citirano: 25.11.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:993535

Radić D. Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom [Diplomski rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Farmaceutsko-biokemijski fakultet; 2016 [pristupljeno 25.11.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:993535

D. Radić, "Optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom", Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Farmaceutsko-biokemijski fakultet, Zagreb, 2016. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:993535

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:163:993535
Podaci o radu
NaslovOptimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK Western blot metodom
Naslov (engleski)Optimizing conditions for determination of the signaling molecules ERK and p38 MAPK by Western blot analysis
AutorDora Radić
MentorLada Rumora (mentor)
Član povjerenstvaLada Rumora (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstvaJasmina Lovrić (član povjerenstva)
Član povjerenstvaMarija Grdić Rajković (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Farmaceutsko-biokemijski fakultet
(Zavod za medicinsku biokemiju i hematologiju)
Zagreb
Datum i država obrane2016-07-01, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		BIOMEDICINA I ZDRAVSTVO
Farmacija
Farmacija
Sažetak
Kronična opstrukcijska plućna bolest karakterizirana je snažnim upalnim odgovorom na inhalaciju štetnih čestica. Dolazi do nakupljanja imunosnih stanica koje luče citokine, kemokine i tkivne proteaze, posljedično tome dolazi do opstrukcije dišnih putova i izazito smanjenog protoka zraka. TLR receptori odgovorni su prvenstveno za urođenu imunost i za pojačavanje odgovora stečenog imuniteta. Nađena je veza između aktivacije TLR receptora, pokretanja kaskadne reakcije kojom dolazi do aktivacije (foforilacije) MAPK kinaza (ERK, p38, JNK) i izlučivanja različitih citokina koji izazivaju upalni odgovor. Cigaretni dim te brojni drugi štetni čimbenici iz okoliša dovode do aktivacije TLR receptora. Agonist TLR4 (LPS) i agonist TLR2 (LTA) koriste se u svrhu ipitivanja upalnog odgovora potaknutog navedenim receptorima.Cilj ovog diplomskog rada bilo je optimiranje uvjeta za određivanje signalnih molekula ERK i p38 MAPK iz THP-1 stanične linije Western blot metodom. Dobiveni rezultati pokazuju da su korištenjem protokola Cell Signaling Technology (CST) postignuti optimalni uvjeti i najbolji rezultati za sva četiri analizirana proteina: ERK, p-ERK, p38 i p-p38. Koncentracija proteina nanesenih na poliakrilamidni gel treba biti između 30 i 40 μg po jažici. Signal pozadine značajno je smanjen korištenjem nitrocelulozne membrane u odnosu na PVDF membranu. Vizualizacija proteina kemiluminiscencijom uz korištenje detekcijske otopine svježe pripremljene u laboratoriju daje konačnu sliku proteina koje se ne razlikuje od slike dobivene uz korištenje komercijalno dostupne otopine (Amersham ECL Prime; GE Healthcare Life Sciences).
Sažetak (engleski)
Chronic obstructive pulmonary disease is characterized by a strong inflammatory response to inhalation of harmful irritating particles. Recruitment of immune cells that secrete cytokines, chemokines and proteases, consequently leads to airway obstruction and reduced air flow. TLR receptors are primarily responsible for innate immunity and they enhance the response of acquired immunity. There was a link between TLR receptors, activation (phosphorylation) of MAPK kinase (ERK, p38, JNK) and the secretion of various cytokines that cause an inflammatory response. TLR4 agonist (LPS) and TLR2 agonist (LTA) might be used for examination of the inflammatory response induced by these receptors. The aim of this study was the optimization of the conditions for determining the signaling molecules ERK and p38 MAPK from THP-1 cell lines by Western blot method. The results show that the optimal conditions and the best results for all the examined proteins ERK, p-ERK, p38 and p-p38 are achieved by using the protocol from Cell Signaling Technology (CST). The concentration of protein applied to the polyacrylamid gel should be between 30 and 40 μg per well. The background signal is significantly reduced by using a nitrocellulose membrane compared to PVDF membrane. Visualization of proteins with chemiluminescence detection solution freshly prepared in the laboratory, gives the final images of the proteins that do not differ significantly from the images obtained with a commercially available solution (Amersham ECL Prime; GE Healthcare Life Sciences).
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:163:993535
Studijski programNaziv: Farmacija
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: integrirani preddiplomski i diplomski
Akademski / stručni naziv: magistar/magistra farmacije (mag. pharm.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaPristup korisnicima matične ustanove
Uvjeti korištenjaIkona licence Zaštićeno autorskim pravom.
Datum i vrijeme pohrane2016-10-27 09:58:58