prikaz prve stranice dokumenta Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija
  Preuzmi
PDF 1.63 MB
diplomski rad
Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2018. urn:nbn:hr:217:325692
Gucunski, Karolina
Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
Kemijski odsjek

Institucijski repozitorij: Repozitorij Prirodoslovno-matematičkog fakulteta

Citirajte ovaj rad

Gucunski, K. (2018). Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija (Diplomski rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:325692

Gucunski, Karolina. "Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2018. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:325692

Gucunski, Karolina. "Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2018. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:325692

Gucunski, K. (2018). 'Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija', Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, citirano: 22.11.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:325692

Gucunski K. Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija [Diplomski rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet; 2018 [pristupljeno 22.11.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:325692

K. Gucunski, "Purinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija", Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb, 2018. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:325692

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:325692
Podaci o radu
NaslovPurinska nukleozidna fosforilaza iz soja 26695 bakterije Helicobacter pylori: ekspresija, pročišćavanje i karakterizacija
Naslov (engleski)Purine nucleoside phosphorylase from bacterium Helicobacter pylori strain 26695: expresion, purification and characterisation
AutorKarolina Gucunski
MentorMarija Luić (mentor)
Član povjerenstvaJasmina Rokov Plavec (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstvaIva Juranović Cindrić (član povjerenstva)
Član povjerenstvaBiserka Prugovečki (član povjerenstva)
Član povjerenstvaMarija Luić (član povjerenstva)
Član povjerenstvaAleksandra Maršavelski (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
(Kemijski odsjek)
Zagreb
Datum i država obrane2018-09-28, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		PRIRODNE ZNANOSTI
Kemija
Sažetak
Cilj ovog rada je proĉišćavanje, karakterizacija i kristalizacija enzima purinske nukleozidne fosforilaze (PNPaza) iz bakterije Helicobacter pylori. PNPaza katalizira reverzibilno fosforolitiĉko cijepanje glikozidne veze ribo- i deoksiribonukleozida, u prisutnosti fosfata kao sekundarnog supstrata u svrhu nastajanja purinske baze i riboze(deoksiriboze)-1-fosfata. Neophodan je enzim kod sinteze purina iz metaboliĉkog otpada, jedinog aktivnog puta za sintezu purina u bakteriji H. pylori. Optimizirana je ekspresija PNPaze u bakteriji Escherichia coli. Prekomjerno eksprimirana PNPaza je proĉišćena anionskom izmjenjivaĉkom kromatografijom i afinitetnom kromatografijom na koloni s vezanim inhibitorom. Aktivnost proĉišćenog enzima ispitana je spektrofotometrijski uz razliĉite primarne supstrate. OdreĊeni su kinetiĉki parametri i ispitana je ovisnost aktivnosti PNPaze o pH i temperaturi reakcijske smjese. Postavljeni su eksperimenti kristalizacije s proĉišćenim enzimom metodom difuzije para u visećoj kapi u razliĉitim uvjetima.
Sažetak (engleski)
The goal of this thesis is to purify, characterise and crystallise purine nucleoside phosphorylase (PNPase) from Helicobacter pylori. PNPase catalyses reversible phosphorolytic cleavage of glycoside bond of ribo- and deoxyribonucleosides, in the presence of phosphate as a secondary substrate to produce purine base and ribose(deoxyribose)-1- phosphate. It is required for purine synthesis through salvage pathway, the only active pathway for purine synthesis in H. pylori. The optimal conditions were found for recombinant expression of PNPase in Escherichia coli. Overexpressed PNPase was subsequently purified by anionic exchange chromatography and affinity chromatography on the column with the inhibitor bound. The activity of the purified enzyme was tested spectrophotometrically with different primary substrates. The kinetic parameters were determined as well as the change of PNPase activity with pH and temperature. The hanging drop vapour diffusion method was applied for crystallisation of the purified enzyme.
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:217:325692
Studijski programNaziv: Kemija; smjerovi: istraživački
Smjer: istraživački
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: diplomski
Akademski / stručni naziv: magistar/magistra kemije (mag. chem.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaOtvoreni pristup
Uvjeti korištenjaIkona licence Zaštićeno autorskim pravom.
Datum i vrijeme pohrane2018-11-26 10:25:20