prikaz prve stranice dokumenta Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.)
  Preuzmi
PDF 1.4 MB
diplomski rad
Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.)
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2017. urn:nbn:hr:217:190534
Zulji, Amel
Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
Biološki odsjek

Institucijski repozitorij: Repozitorij Prirodoslovno-matematičkog fakulteta

Citirajte ovaj rad

Zulji, A. (2017). Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.) (Diplomski rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:190534

Zulji, Amel. "Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.)." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2017. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:190534

Zulji, Amel. "Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.)." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2017. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:190534

Zulji, A. (2017). 'Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.)', Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, citirano: 27.12.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:190534

Zulji A. Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.) [Diplomski rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet; 2017 [pristupljeno 27.12.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:190534

A. Zulji, "Auksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.)", Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb, 2017. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:190534

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:190534
Podaci o radu
NaslovAuksin-hidrolaze: analiza i regeneracija mutanata uročnjaka (Arabidopsis thaliana L.)
Naslov (engleski)Auxin-hydrolases: analysis and regeneration of Arabidopsis thaliana L. mutants
AutorAmel Zulji
MentorNataša Bauer (mentor)
Član povjerenstvaNataša Bauer (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstvaMarin Ježić (član povjerenstva)
Član povjerenstvaIvana Šola (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
(Biološki odsjek)
Zagreb
Datum i država obrane2017-02-27, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		PRIRODNE ZNANOSTI
Biologija
Sažetak
U ovom radu su opisani mehanizmi biosinteze, transporta i konjugacije indol-3-octene kiseline (IAA), kao dominantnog oblika auksina, i njen učinak na razvojne i fiziološke procese, s posebnim osvrtom na spoznaje o detaljima tih procesa kod eksperimentalne biljke Arabidopsis thaliana. Tehnologijom in-fusion sintetiziran je binarni vektor pHOV:AtILL2-GFP, te su metodom floral dip regenerirane transgenične biljke A. thaliana ekotip WS i Col-0 s pojačanom ekspresijom gena AtILL2 i rekombinantnog gena AtILL2-GFP. Lokalizacija fuzijskog proteina AtILL2-GFP, praćena fluorescencijskom mikroskopijom, sugerira endoplazmatski retikulum kao mjesto djelovanja hidrolaze ILL2, što je u skladu s dosadašnjim rezultatima istraživanja. Analizirane su mutante s utišanom ekspresijom gena AtILR1, AtILL2 i AtIAR3, te je metodama PCR-a i elektroforeze izdvojena jednostruka nul mutanta ill2-1 u kojoj je identificirana insercijska mutacija u genu AtILL2 koja uzrokuje pomak u okviru čitanja i sintezu krnjeg, nefunkcionalnog proteina. Metodama PCR-a i sekvenciranja izdvojene su jednostruke mutante ilr1-1 i iar3-2 u kojima je identificirana mutacija Gly224Glu u genu AtIAR3 (mutanta iar3-2) i mutacija Gly139Asp u genu AtILR1 (mutanta ilr1-1) koje uzrokuju potpuni ili djelomični gubitak funkcije hidrolaza ILR1 i IAR3. Kombinacijom PCR-a, elektroforeze i sekvenciranja izdvojena je dvostruka mutanta ill2-1/iar3-2 koja ima mutaciju Gly224Glu u genu AtIAR3 i insercijsku mutaciju u genu AtILL2, i trostruka mutanta ilr1-1/ill2-1/iar3-2 koja ima mutaciju Gly139Asp u genu AtILR1, insercijsku mutaciju u genu AtILL2 i mutaciju Gly224Glu u genu AtIAR3. Mutante dobivene i analizirane u ovom radu dalje će se koristiti za istraživanja metabolizam IAA naročito tijekom izloženosti biljaka abiotskom stresu.
Sažetak (engleski)
Indole acetic acid (IAA) is the most dominant form of the naturally occurring auxin in Arabidopsis thaliana. Here, the mechanisms of biosynthesis, transport and conjugation of IAA in A. thaliana are reviewed, and mutants involved in IAA-aminoacid hydrolyze analyzed and regenerated. Binary vector pHOV:AtILL2-GFP was synthesized by using in-fusion technology, and transgenic A. thaliana plants, ecotypes WS and Col-0, with overexpression of AtILL2 and AtILL2-GFP transgenes were regenerated after floral dip transformation. Localization of protein AtILL2-GFP, tracked by fluorescence microscopy, suggest endoplasmic reticulum as the site of action of hydrolase ILL2. Mutants with reduced expression of AtILR1, AtILL2 and AtIAR3 genes were analyzed. Using PCR and electrophoresis mutant ill2-1 with insertional mutation in gene AtILL2, which causes synthesis of truncated nonfunctional protein, was confirmed. Mutants ilr1-1 and iar3-2 were analysed using PCR and sequencing. The mutations Gly224Glu, and Gly139Asp were confirmed in AtIAR3 (iar3-2 mutant) and AtILR1 gene (ilr1-1 mutant), respectively. The double mutant ill2-1/iar3-2 contained mutation Gly224Glu in gene AtIAR3 and insertional mutation in gene AtILL2, and the triple mutant ilr1-1/ill2-1/iar3-2 contained mutation Gly139Asp in gene AtILR1, insertional mutation in gene AtILL2 and mutation Gly224Glu in gene AtIAR3. All mutants will be used further to investigate IAA metabolism, especially during abiotic stress.
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:217:190534
Studijski programNaziv: Molekularna biologija
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: diplomski
Akademski / stručni naziv: magistar/magistra molekularne biologije (mag. biol. mol.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaOtvoreni pristup
Uvjeti korištenjaIkona licence Zaštićeno autorskim pravom.
Datum i vrijeme pohrane2017-04-20 11:17:24