prikaz prve stranice dokumenta Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina
Pristup korisnicima matične ustanove
diplomski rad
Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2015. urn:nbn:hr:217:066939
Vizjak, Petra
Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
Biološki odsjek

Institucijski repozitorij: Repozitorij Prirodoslovno-matematičkog fakulteta

Citirajte ovaj rad

Vizjak, P. (2015). Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina (Diplomski rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:066939

Vizjak, Petra. "Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2015. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:066939

Vizjak, Petra. "Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2015. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:066939

Vizjak, P. (2015). 'Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina', Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, citirano: 04.11.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:066939

Vizjak P. Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina [Diplomski rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet; 2015 [pristupljeno 04.11.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:066939

P. Vizjak, "Strukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina", Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb, 2015. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:066939

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:066939
Podaci o radu
NaslovStrukturna karakterizacija histon - vezujućih proteina
Naslov (engleski)Structural characterization of histone binding proteins
AutorPetra Vizjak
MentorMario Halić (mentor)
MentorVlatka Zoldoš (mentor)
Član povjerenstvaVlatka Zoldoš (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstvaDijana Škorić (član povjerenstva)
Član povjerenstvaDamjan Franjević (član povjerenstva)
Član povjerenstvaNataša Bauer (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
(Biološki odsjek)
Zagreb
Datum i država obrane2015-02-26, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		PRIRODNE ZNANOSTI
Biologija
Sažetak
Histoni su osnovna proteinska komponenta kromatina. Histonski šaperon Nap1, zajedno s karioferinom Kap114, transportira H2A-H2B iz citoplazme u jezgru. Djelovanje metiltransferaze Nop1, u kompleksu s proteinom Nop56, ključno je za nastanak metilacije H2AQ105, prve epigenetičke oznake posvećene specifičnoj RNA-polimerazi. Cilj ovog rada bio je strukturno karakterizirati komplekse histona s tim histon-vezujućim proteinima. Korištene su standardne metode molekularnog kloniranja. Proteini su pročišćavani afinitetnom kromatografijom, ionizmjenjivačkom kromatografijom i kromatografijom isključenjem. Proteini su analizirani SDS-poliakrilamidnom gel-elektroforezom i masenom spektrometrijom. Pokazali smo da Nap1 (H. sapiens) tvori kompleks s dimerom H2A-H2B (X. laevis). Terminalne domene Nap1 nisu nužne za nastanak kompleksa. Dijelovi kompleksa koji su važni za njegovu stabilnost, zaštićeni su od djelovanja proteaze. Potvrđene su interakcije Nap1-H2A-H2B s Kap114 (S. pombe). Kompleksi Nap1-H2A-H2B i Nap1-H2A-H2B-Kap114 su pročišćeni i postavljene su pretkristalizacijske probe na kristalizacijskom robotu. Kompleks Nop1-Nop56 (K. lactis) dobiven je in vitro. N-terminalna domena Nop1 nije potrebna za interakciju s Nop56. Kompleks tvori topljive agregate što otežava njegovo pročišćavanje. Na temelju ovih rezultata, razvit će se nove strategije za pročišćavanje ciljnih proteina. Daljnja istraživanja doprinjet će razumijevanju biologije kromatina i bolesti povezanih s histonskim šaperonima.
Sažetak (engleski)
Histones are the chief protein components of chromatin. Histone chaperone Nap1, together with karyopherin Kap114, shuttles H2A-H2B from cytosol to the nucleus. Nop1 methyltransferase in complex with Nop56 protein is responsible for H2AQ105 methylation, the first histone epigenetic mark dedicated to a specific RNA polymerase. The aim of this project was to structurally characterize histones in complex with these histone binding proteins. Standard molecular cloning techniques were used. Proteins were purified by affinity, ion exchange and size exclusion chromatography. Proteins were analyzed by SDS-poliacrylamide gel-electrophoresis and mass sprectrometry. We have shown that Nap1 (H. Sapiens) forms a complex with H2A-H2B (X. laevis) dimer. Nap1 terminal domains are not necessary for complex formation. Regions important for complex stability are protected from protease cleavage. Interaction between Nap1-H2A-H2B and Kap114 (S. Pombe) was confirmed. Complexes Nap1-H2A-H2B and Nap1-H2A-H2B-Kap114 were purified and precrystallization screenings were set up on crystallization robot. Nop1-Nop56 (K. lactis) complex was formed in vitro. Nop1 N-terminal domain is dispensable for interaction with Nop56. Complex forms soluble aggregates which has made purification difficult. Based on obtained results, new purification strategies will be developed. Further research will contribute to understanding of chromatin biology and the human diseases associated with histone chaperones.
Ključne riječi
Ključne riječi (engleski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:217:066939
Studijski programNaziv: Molekularna biologija
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: diplomski
Akademski / stručni naziv: magistar/magistra molekularne biologije (mag. biol. mol.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaPristup korisnicima matične ustanove
Uvjeti korištenjaIkona licence Zaštićeno autorskim pravom.
Datum i vrijeme pohrane2017-04-25 08:39:31