prikaz prve stranice dokumenta Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells
  Preuzmi
PDF 2.44 MB
diplomski rad
Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells
Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2021. urn:nbn:hr:217:277341
Kufrin, Vida
Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
Biološki odsjek

Institucijski repozitorij: Repozitorij Prirodoslovno-matematičkog fakulteta

Citirajte ovaj rad

Kufrin, V. (2021). Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells (Diplomski rad). Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet. Preuzeto s https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:277341

Kufrin, Vida. "Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2021. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:277341

Kufrin, Vida. "Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells." Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, 2021. https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:277341

Kufrin, V. (2021). 'Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells', Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, citirano: 24.11.2024., https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:277341

Kufrin V. Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells [Diplomski rad]. Zagreb: Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet; 2021 [pristupljeno 24.11.2024.] Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:277341

V. Kufrin, "Generation and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells", Diplomski rad, Sveučilište u Zagrebu, Prirodoslovno-matematički fakultet, Zagreb, 2021. Dostupno na: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:277341

Za citiranje koristite ovu mrežnu adresu: https://urn.nsk.hr/urn:nbn:hr:217:277341
Podaci o radu
NaslovGeneration and characterization of a double reporter cell line for following maturation of hESC-derived β-cells
Naslov (hrvatski)Uspostavljanje i karakterizacija stanične linije sa sustavom dva reportera kao modela za praćenje sazrijevanja beta-stanica izvedenih iz embrionalnih matičnih stanica
AutorVida Kufrin
MentorAnthony Galavas (mentor)
MentorInga Urlić (sumentor)
Član povjerenstvaInga Urlić (predsjednik povjerenstva)
Član povjerenstvaMartina Šeruga Musić (član povjerenstva)
Član povjerenstvaDomagoj Đikić (član povjerenstva)
Član povjerenstvaRomana Gračan (član povjerenstva)
Ustanova koja je dodijelila
akademski / stručni stupanj		Sveučilište u Zagrebu
Prirodoslovno-matematički fakultet
(Biološki odsjek)
Zagreb
Datum i država obrane2021-09-28, Hrvatska
Znanstveno / umjetničko
područje, polje i grana		PRIRODNE ZNANOSTI
Biologija
Sažetak
Diabetes mellitus is a group of metabolic disorders primarily affecting pancreatic β-cells. Due to the limitations of existing therapy options for insulin-deficient diabetes, great efforts are put into developing cell-based replacement therapies utilizing human pluripotent stem cells. However, existing differentiation protocols, based on developmental principles in vivo, often result in the generation of cells that are not fully mature and functional. To improve and optimize existing protocols for hPSC reprogramming, we developed a novel H1 INSeGFP/ MAFA-mCherry double reporter cell line using CRISPR-Cas9 technology. Herein, detailed characterization and assessment of differentiation potential of novel cell line is reported. H1 INS-eGFP/MAFA-mCherry reporter line can reproducibly and efficiently differentiate to form β-cells while preserving pancreatic identity likewise paternal unmodified H1 cell line. Furthermore, H1 INS-eGFP/MAFA-mCherry derived β-cells express functionality and maturation related genes and can respond to glucose challenges in vitro. Also, both GFP and mCherry integrated reporter genes are fully functional in novel cell line. Reported findings led to the validation of a novel reporter cell line that will serve as a valuable tool in unraveling novel strategies to achieve a high-efficiency differentiation that presents one more step required for the translation of this approach to the clinic setting.
Sažetak (hrvatski)
Dijabetes je metabolički poremećaj koji primarno pogađa β-stanice gušterače. Budući da su postojeće terapijske opcije za pacijente sa smanjenom razinom inzulina ograničene, velike nade polažu se u stanične terapije temeljene na humanim pluripotentnim matičnim stanicama. Međutim, postojeći protokoli diferencijacije, temeljeni na razvojnim principima in vivo, često rezultiraju generacijom β-stanica koje nisu u potpunosti zrele i funkcionalne. Kako bi se protokoli diferencijacije unaprijedili i optimizirali, razvili smo novu dvostruku reportersku liniju H1 INS-eGFP/MAFA-mCherry koristeći tehnologiju CRISPR-Cas9. U ovom radu prikazana je detaljna karakterizacija i procjena diferencijacijskog potencijala nove stanične linije. Linija H1 INS-eGFP/MAFA-mCherry ima sposobnost efikasne i reproducibilne diferencijacije u β-stanice pritom zadržavajući identitet usporediv s nemodificiranom roditeljskom staničnom linijom H1. Nadalje, H1 INS-eGFP/MAFA-mCherry izvedene β- stanice eksprimiraju gene važne za funkcionalnost i sazrijevanje te imaju sposobnost odgovora na promjene u koncentraciji glukoze in vitro. Također, ugrađeni reporterski geni GFP i mCherry su potpuno stabilni i funkcionalni u ovoj staničnoj liniji. Provedeno istraživanje potvrdilo je ispravnost nove stanične linije koja će biti korištena kao vrijedan alat u dizajnu novih strategija za efikasnu diferencijaciju te predstavljati jedan korak više ka kliničkim ispitivanjima novih terapija za dijabetes.
Ključne riječi
Ključne riječi (hrvatski)
Jezikhrvatski
URN:NBNurn:nbn:hr:217:277341
Studijski programNaziv: Molekularna biologija
Vrsta studija: sveučilišni
Stupanj studija: diplomski
Akademski / stručni naziv: magistar/magistra molekularne biologije (mag. biol. mol.)
Vrsta resursaTekst
Način izrade datotekeIzvorno digitalna
Prava pristupaOtvoreni pristup
Datum isteka embarga: 2023-09-28
Uvjeti korištenjaIkona licence Zaštićeno autorskim pravom.
Datum i vrijeme pohrane2021-10-08 10:38:33